Wenn ihre Besitzer nicht hinschauen, erwachen die Spielzeuge zum Leben. Als Andy’s Lieblingsspielzeug hat dann die Cowboypuppe Woddy im Kinderzimmer das Sagen. Das ändert sich, als Andy den Actionhelden Buzz Lightyear geschenkt bekommt. Woddy ist nun bei Andy abgemeldet. Auch die anderen Spielzeuge sind von Buzz begeistert. Woddy ist eifersüchtig und will Buzz in eine dunkle Ecke des Kinderzimmers stoßen. Aber Buzz liegt aus dem Fenster. Nun überschlagen sich die Ereignisse. Schließlich stranden Woddy und Buzz gemeinsam an einer Tankstelle, auf sich allein gestellt, fernab von Andy und dem schützenden Kinderzimmer...
Als erster abendfüllender computeranimierter Film schrieb Toy Story Filmgeschichte und begründete den Ruhm von Pixar. Es folgten die Sequels Toy Story 2, Toy Story 3 und Toy Story 4: Alles hört auf kein Kommando.